Schistosomiasis kvalitatív vizsgálat, A Schistosomiasis Mansoni átterjedésének Csökkenése Ománban


A gyors, egyszerű, érzékeny és specifikus szero-diagnosztikai teszt hiánya azonban még mindig akadályt jelent a kontroll gyakorlatban.

Itt egy elektrokémiai immunszenzor tömböt ECISA dolgoztunk ki egy interfaciális ko-összeállítási stratégiával. Egy hordozható elektrokémiai detektort alkalmaztunk antitestek kimutatására a szérum mintákban. Ezért bebizonyítottuk, hogy ez a gyors, érzékeny és specifikus ECISA-technika képes az Sj-fertőzés nagymértékű helyszíni szűrésére.

Bevezetés A schistosomiasis schistosomiasis kvalitatív vizsgálat egyik leggyakoribb parazita betegség, amely több mint millió embert fenyeget 76 trópusi és szubtrópusi országban 1. Schistosomiasis japonica Sjamelyet Schistosoma japonicum fertőzése okoz, továbbra is jelentős közegészségügyi probléma Kínában, és jelentős gazdasági és közegészségügyi következményekkel jár 2, 3, 4.

A korai és gyors diagnózis az Sj hatékony kontrolljának schistosomiasis kvalitatív vizsgálat. Valamennyi szero-diagnosztikai reagens és a schistosomiasis készletek az antitest Ab kimutatásán alapulnak, amelyet úgy schistosomiasis kvalitatív vizsgálat, hogy a színreakciót szabad szemmel vagy abszorpciós olvasóval szemléljük.

Ezeket a módszereket azonban még mindig korlátozzák az 5, 11 érzékenységük, bonyolult és időigényes műveleteik, valamint a kifinomult 5, 6 műszerek, amelyek nagyban gátolják az Sj helyszíni nagyszabású szűrését.

Ezért gyors, egyszerű és hordozható teszteket kell kidolgozni az Sj-hez nagy érzékenységgel és specifitással. Az Sj-detektáláshoz kapcsolódó másik fontos probléma az antigének, amelyek az Sj antitestek rögzítésére szolgálnak.

Bár az ilyen SEA-alapú készletek nagy érzékenységgel rendelkeznek, a specifitás gyakran elégtelen, mivel valószínűleg gazdasejt-antigént vagy közös antigén komponenst tartalmaz más típusú parazitákkal 5, 6. Továbbá a natív fehérje alapú reagens költsége jelentősen megnövekedett a fertőzött csigák korlátozott mennyisége miatt.

Ezért nehéz a nyers natív antigént nagy mennyiségben 12 előállítani és a minőség szabályozására, korlátozva alkalmazását a schistosomiasis nagy léptékű szűrésére. Az ilyen barikádok kiküszöbölésére rekombináns antigéneket pl.

szívférgek elleni vakcina

RSj32, rSj31, rSj26 fejlesztettek ki az SEA helyettesítésére, azonban az Sj antitesttel SjAb való affinitásuk még mindig korlátozott, és a vizsgálatok alacsony érzékenységet mutattak 13, 14, 15, Az utóbbi években egyre növekvő érdeklődés mutatkozik az elektrokémiai immunszenzorok fejlesztésére a diagnosztikai vizsgálatokban, főként az alacsony költségű és a kisméretű elektrokémiai detektorok miatt, amelyek különösen alkalmasak a terepi felismerésre 11, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, Az elektrokémiai immunszenzorok kifejlesztésére irányuló korábbi erőfeszítések SjAb-hez egy 32 kDa-os S.

Ezenkívül az egyes elektródátalakítókon az antigén immobilizálási módszerei bonyolultak, nem alkalmasak a humán szérum minták 26, 27, 28, 29, 30 multiplex analízisére. Itt egy új, hordozható multiplexelő elektrokémiai immunszenzor tömböt ECISA mutatunk be az SjAb minőségi kimutatására a humán szérumban. A szitanyomás egy vastagfólia-technológia, amely szita-nyomtatott szén-elektróda SPCE tömeggyártására alkalmazható nagyon alacsony költséggel és nagy reprodukálhatósággal 31, 32, 33, 34, Egy kooperációs stratégiát dolgoztunk ki a rekombináns Schistosoma japonicum kalciumkötő fehérje SjE16 és a SEA 39, 40 immobilizálására SPCE tömbökön, hogy javítsuk az érzékenységet schistosomiasis kvalitatív vizsgálat a specificitást, és csökkentsük a költségeket.

Az ilyen immunszenzor tömböt házi készítésű elektrokémiai detektorral transzdukáljuk. Eredmények Az SPCE tömb elektrokémiai teljesítményét a ferricianid redox aktivitásával CV-vel értékeltük a 16 csatornás elektrokémiai eszközzel.

Clinical Research News

A CV adatok lásd az s3. Kiegészítő adatok Az s4A. Ábra egy tipikus CV-görbét mutatott be a TMB számára, amely két pár jellegzetes redoxcsúcsot mutatott.

  1. Tisztítja a paraziták testét az allergiától
  2. Méregtelenítő kiegészítők, amelyek működnek

Az aktuális és az idő IT görbét alkalmaztuk, és a potenciál -0, 1 V-on tartottuk a CV görbe szerint kiegészítő adatok, s4B ábrahogy schistosomiasis kvalitatív vizsgálat elektródok felületén a TMB redukciós áramát kapjuk. Az áram a szkennelési idővel 50 s-ig stabil állapotig nőtt. Az antigének összeszerelése előtt az SPCE-tömb összes szén-dioxid-működési elektródjának elektrokémiai aktiválását végeztük karboxilátcsoportok előállítására.

Schistosomiasis kvalitatív vizsgálat elektrokémiai aktiválást oxidációs-redukciós reakcióval végeztük, és az SPCE-tömb reprodukálható felületi tulajdonságát közvetlenül CV-görbe mutatta kiegészítő adatok, s5.

Ebben a vizsgálati eljárásban a H 2 O 2 -ot, a HRP-szubsztrátot tartalmazó TMB redox-aktivitása az elektródák áramának változását indukálja, így az SPCE-vel szembeni immunreakció detektálható azáltal, hogy mérjük a redukciós áramot egy bizonyos potenciál a 16 csatornás elektrokémiai detektorral. Az SJAb kvalitatív diszkriminációját negatív referencia szérumban és pozitív referencia szérumban végeztük az ECISA megvalósíthatóságának tesztelésére. A PBST-t üres kontrollként használtuk.

Az amperometriás mérést az SjAb szérumban történő meghatározására alkalmaztuk, míg a potenciál -0, 1 V-on tartottuk a CV görbe szerint.

A szérummintákban levő antitestek és a HRP-Ab 2 jelszonda immunkomplexet képez a munkaelektródon lévő rögzítési antigénnel, ami a HRP elektródához való kötődéséhez vezetett, amely a katalitikus amperometriás leolvasássá alakítható.

Ábra az inkubációs idő hatását mutatja az SjAb detektálás amperometriás válaszaira a referencia szérumban.

A szemölcsök kezelése szembe kell néznie - Méregtelenítés sós vízzel

Az inkubációs idő növekedésével a pozitív referenciaszérumban az SjAb-re adott amperometriás válaszok gyorsan emelkedtek 30 perc alatt, és 45 percen belül következetesek lettek. A negatív referencia szérum nemspecifikus kötődése azonban az inkubációs idő alatt is növekedett.

Ezenkívül az elektrokémiai vizsgálatot közvetlenül az inkubációs lépés után végezhetjük el, ellentétben az ELISA-val, amely gyakran további inkubációt igényel a szubsztrátummal. A fentiekben bemutatott amperometriás áram a kezdeti katalitikus amperometriás érték.

papilloma a torok tüneteiben

Teljes méretű kép Összehasonlítunk három összeszerelési eljárást az azonos immobilizációs idővel, beleértve az egyedi antigéneket és két antigént. Ezenkívül összehasonlítottuk a három összeszerelési stratégia hatásait az ECISA érzékenységére és sajátosságaira. Tíz negatív referenciaszérum mintát és 10 pozitív referencia mintát vizsgáltunk az összehasonlításhoz.

A Schistosomiasis Mansoni átterjedésének Csökkenése Ománban

Ezek az adatok egyértelműen kimutatták, hogy a ko-összeszerelési megközelítés jobb, mint az SjAb kimutatásában az egyetlen antigénnel történő immobilizáció. Teljes méretű kép Az immunszenzor tömbön belüli vizsgálati variációt és a tesztek közötti intervallumot a referencia szérum egy tételére vonatkozó ismételt kimutatások szorosára és három referencia-szérumot tartalmazó ismételt kimutatás szeresére értékeltük.

a papillómát eltávolítják kolonoszkópiára

Az immunszenzor tömb stabilitását is értékeltük. A 16 d-nál a negatív szérum és a pozitív szérum jele konzisztens maradt lásd a Kiegészítő adatok s6A. Bebizonyosodott, hogy az immunszenzor tömb jó tárolási stabilitással rendelkezik, és praktikus alkalmazásra alkalmas.

Az új módszer vizsgálati teljesítményének bemutatásához szérummintákat 35 schistosomiasis japonica, 5 clonorchiasis, 9 trichinosis, 10 cysticercosis és 7 paragonimiasis, 15 normális humán szérum kontrollként ECISA-val és ELISA-val teszteltünk.

Teljes méretű kép A statisztikai analízis eredményeit az 1. Ez utóbbi esetében valószínűleg más parazita fajokkal közös antigén komponense van. Összefoglalva, kidolgoztunk egy elektrokémiai immunszenzor tömb ECISA technikát, egy érzékeny, specifikus és gyors diagnosztikát az SjAb kimutatásával az eldobható 16 csatornás SPCE tömb és egy elektrokémiai detektor segítségével.

Videó: Utazási figyelmeztetés az ausztráliai tüzek miatt 2021, Április

Az immunszenzor tömböket a rekombináns SjE16 antigénnel és nyers SEA antigénnel 8: 1 történő ko-összeállítással állítottuk elő. A rekombináns antigén alkalmazása a natív antigén mennyiségének nagyrészt helyettesítésére segítene a korlátozott erőforrás tökéletlenségének és a natív antigén hosszú előkészítési folyamatának ELISA rendszerben növekvő költségeinek leküzdésében.

Tekintettel arra, hogy mind az elektrokémiai detektorok, mind az SPCE tömbök alacsony költségűek és hordozhatóak, schistosomiasis kvalitatív vizsgálat a vizsgálat sokkal könnyebb és gyorsabb lenne, ha egy számítógépes program a diagnosztikai tanácsadás közvetlen kimenetére van beállítva, az ECISA új megvalósítható eszközt biztosíthat a schistoszomiasis nagyszabású szűrése. Mód Berendezés Az ECISA ciklikus voltaméteres CV mérését és amperometriás mérését egy hordozható, 16 csatornás elektrokémiai detektorral ECH16 végeztük, amely egy számítógéphez van csatlakoztatva további részletekért lásd: Kiegészítő adatok s1.

A munkaterület körül egy szigetelőréteget nyomtatunk, amely az elektrokémiai mikrocella tartályát képezi. Shenzhen, Kína cégtől vásárolták. A humán papillomavírus in vitro referencia-szérumot, a pozitív referencia-szérumot, a 15 normál humán szérumot, 35 schistosomiasis-szérumot, 5 klonorchiasis-szérumot, 9 trichinosis-szérumot, 10 ciszticercosis-szérumot és 7 paragonimiasis-szérumot szolgáltattak a Nemzeti Betegségbetegségek Intézetéből, a Kínai Betegségellenőrzési Központból.

Minden adományozó írásos beleegyezését szereztük be, és a helyi etikai bizottság a humán kutatásokról szóló tanulmányunkhoz kapott jóváhagyást.

Többnyelvű kivonatok

Louis, USA. Az elektrokémiai méréshez használt puffer TMB szubsztrát volt. Minden oldatot egy Millipore rendszerből kettős desztillált minőségű vízzel állítottunk elő. Az SPCE tömböket elektrokémiailag előkezeltük, hogy a karboxilsav-csoportokat a munkaelektródon előállítsuk a CV-t a 16 csatornás elektrokémiai detektorral.